ATP(Adenosine Triphosphate)，中文名為腺嘌呤核苷三磷酸，又叫三磷酸腺苷。它普遍存在于細(xì)菌等微生物細(xì)胞內(nèi)，ATP是微生物新陳代謝的能量物質(zhì)。ATP生物發(fā)光法是利用ATP試劑中若干組分如熒光素-熒光素酶等與被測(cè)樣本反應(yīng)產(chǎn)生光子，再利用專(zhuān)門(mén)研制的熒光檢測(cè)儀來(lái)捕捉和檢測(cè)發(fā)光值，由于被測(cè)樣本所含細(xì)菌等微生物的數(shù)量與所含的ATP值、以及ATP值與發(fā)光值之間存在一定的函數(shù)關(guān)系，因此通過(guò)檢測(cè)發(fā)光值即能得到被測(cè)標(biāo)本所含細(xì)菌等微生物含量。

國(guó)內(nèi)外ATP儀器

手持ATP儀比臺(tái)式ATP儀更適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)

為了滿(mǎn)足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求，ATP熒光檢測(cè)儀宜選擇手持ATP熒光檢測(cè)儀（也叫手持式ATP熒光檢測(cè)儀），而實(shí)現(xiàn)流動(dòng)狀態(tài)即時(shí)檢測(cè)，因?yàn)楸M管大型的臺(tái)式ATP熒光檢測(cè)儀在靈敏度方面可能優(yōu)于手持式ATP儀,但它只能在實(shí)驗(yàn)室狀態(tài)下使用，不利于餐飲服務(wù)、醫(yī)療感控等流動(dòng)場(chǎng)所現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。

ATP方法使用和評(píng)價(jià)

ATP熒光檢測(cè)法能在十幾秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)，它大大提升了傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法24-48小時(shí)的工作效率，ATP方法的實(shí)現(xiàn)包括儀器、試劑和如何使用三大要素。

儀器

當(dāng)儀器和試劑配合使用，整體靈敏度達(dá)到10-10摩爾ATP范圍時(shí)，可以用于 食品表明微生物檢測(cè)、手衛(wèi)生檢測(cè)、餐飲器具潔凈度檢測(cè)、重點(diǎn)科室和重要活動(dòng)場(chǎng)所（如奧運(yùn)會(huì)、世博會(huì)、人大政協(xié)會(huì)議等）物表檢測(cè)和衛(wèi)生安保、食品加工器具、工作臺(tái)等關(guān)鍵控制點(diǎn)消毒結(jié)果檢測(cè)、醫(yī)療環(huán)境工作平臺(tái)（器械表面、內(nèi)窺鏡、空調(diào)進(jìn)出氣口）衛(wèi)生學(xué)即時(shí)評(píng)估，其實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求；可用于更高要求的檢測(cè)如復(fù)用醫(yī)療器械清洗效果后評(píng)估和二次清潔處理評(píng)價(jià)、醫(yī)療用水檢測(cè)等。當(dāng)然目前國(guó)外ATP設(shè)備和試劑的研發(fā)已經(jīng)向更高目標(biāo)——可檢測(cè)到1O至10摩爾水平的ATP努力，檢測(cè)試劑也可達(dá)到5個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的水平。

試劑

的ATP試劑盒，必須是可去除游離ATP和體細(xì)胞ATP，只針對(duì)細(xì)菌細(xì)胞ATP檢測(cè)，所謂去除干擾物，這是基本要求。其次熒光素酶、蟲(chóng)螢光素、裂解液、取樣拭子等組分設(shè)計(jì)成一體化，整體便于現(xiàn)場(chǎng)攜帶方便檢測(cè)使用，試想如果不是ATP試劑一體化拭子形式，而是各組分瓶瓶罐罐帶到現(xiàn)場(chǎng)臨時(shí)配制試劑如何能做到準(zhǔn)確性和現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)呢？

如何使用

取樣

是影響準(zhǔn)確性和一致性的關(guān)鍵之一，可按照<<醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)附錄A（規(guī)范性附錄）采樣及檢查方法>>等規(guī)范要求再參照手持式ATP儀說(shuō)明書(shū)采樣、檢測(cè)、計(jì)算得出結(jié)果并記錄報(bào)告。采樣：（面積類(lèi)）將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來(lái)回涂擦個(gè)兩次（一只手涂擦面積約30cm2），并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣拭子。（體積類(lèi)）將ATP拭子采樣棒一支在待測(cè)液體充分浸濕。檢測(cè)：將拭子放入手持ATP儀，獲得被測(cè)樣本與細(xì)菌污染程度相對(duì)應(yīng)的ATP生物熒光值，得出菌落數(shù)指標(biāo)（詳見(jiàn)下文操作步驟及定標(biāo)評(píng)價(jià)）。

結(jié)果判讀

以上取樣、檢測(cè)全過(guò)程在1分鐘之內(nèi)快速完成，比起24-48小時(shí)的傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)巨大。細(xì)菌數(shù)量與細(xì)菌內(nèi)所含ATP量有明確的相關(guān)性，通過(guò)檢測(cè)ATP含量可間接得出細(xì)菌數(shù)量，即ATP熒光檢測(cè)儀檢測(cè)結(jié)果顯示的發(fā)光值——相對(duì)照度單位RLU讀數(shù)與常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果菌落數(shù)CFU具有很高的相關(guān)性，兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)上的顯著差異，因此這也是ATP熒光法細(xì)菌檢測(cè)的理論基礎(chǔ)。舉例來(lái)說(shuō)，某食品加工廠(chǎng)上班前使用ATP檢測(cè)儀對(duì)生產(chǎn)工人進(jìn)行手衛(wèi)生檢測(cè)，檢測(cè)值<80RLU合格參考值時(shí)，判定洗手消毒合格；檢測(cè)值≥80RLU合格參考值時(shí)判定洗手消毒不合格，需要重新洗手直至滿(mǎn)足規(guī)定的合格參考值才能上崗工作，合格參考值（如80）的確定需科學(xué)合理，不同應(yīng)用場(chǎng)合不建議規(guī)定統(tǒng)一的參考值，須根據(jù)不同品牌ATP熒光儀、ATP試劑、被測(cè)對(duì)象潔凈度不同要求等具體情況和對(duì)一定量的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析來(lái)確定。